? ? ?標(biāo)準(zhǔn)菌株是微生物實驗室不可或缺的一部分,正確管理和使用標(biāo)準(zhǔn)菌株對于保證實驗室工作的科學(xué)性和可靠性至關(guān)重要。下面小編為您介紹一下菌株使用的相關(guān)要求和常見的菌株保藏方法。
菌株來源與代數(shù)管理相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)要求
1、GB 4789.28-2013 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗 培養(yǎng)基和試劑的質(zhì)量要求
2.28 標(biāo)準(zhǔn)菌株:直接從官方菌種保藏機(jī)構(gòu)獲得并至少定義到屬或種的水平的菌株。按菌株特性進(jìn)行分類和描述,最好來源于食品或水的菌株。
2.29 標(biāo)準(zhǔn)儲備菌株:將標(biāo)準(zhǔn)菌株在實驗室轉(zhuǎn)接一代后得到的一套完全相同的獨(dú)立菌株。
2.30 儲備菌株:從標(biāo)準(zhǔn)儲備菌株轉(zhuǎn)接一代獲得的培養(yǎng)物。
2.31 工作菌株:由標(biāo)準(zhǔn)儲備菌株、儲備菌株或標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(經(jīng)證明或未經(jīng)證明)轉(zhuǎn)接一代獲得的菌株。
2、CNAS-CL01-A001:2022檢測和校準(zhǔn)實驗室能力認(rèn)可準(zhǔn)則在微生物檢測領(lǐng)域的應(yīng)用說明
6.4.3.1 工作菌株的傳代次數(shù)原則上不得超過5次,通常情況下,從菌種保藏機(jī)構(gòu)獲得的標(biāo)準(zhǔn)菌株可視為第0代。除非標(biāo)準(zhǔn)方法中有明確要求,或?qū)嶒炇夷軌蜃C明其相關(guān)特性沒有改變。
3、GB/T27405-2008 實驗室質(zhì)量控制規(guī)范 食品微生物檢測
5.5.2.4 所有的標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物從儲備菌株傳代培養(yǎng)次數(shù)不得超過5次,除非標(biāo)準(zhǔn)方法中要求并規(guī)定,或?qū)嶒炇夷芴峁┪募C據(jù)證明其相關(guān)性沒有改變。
4、《中國藥典2020版》(四部)?
9203 藥品微生物實驗室質(zhì)量管理指導(dǎo)原則:工作菌株的傳代次數(shù)應(yīng)嚴(yán)格控制,不得超過5代(從菌種保藏機(jī)構(gòu)獲得的標(biāo)準(zhǔn)菌株為第0代)
以上標(biāo)準(zhǔn)均提到菌株需要來源于官方保存機(jī)構(gòu),且工作菌株傳代次數(shù)不能超過5代。因此,為了滿足每次使用的工作菌株都能達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)對代數(shù)的要求,我們需要對購買的標(biāo)準(zhǔn)菌株做好保藏規(guī)劃。下面我們來介紹一下菌株保藏的方法。
常見菌株保藏方法
? ? ?菌株保藏原理:根據(jù)微生物生理、生化特點(diǎn),人工創(chuàng)造條件(主要是低溫、干燥、缺氧),使微生物的代謝處于不活潑、生長繁殖受抑制的休眠狀態(tài),以達(dá)到保持純種優(yōu)良性狀的目的。

為了保證菌株的有效保藏,同一菌株應(yīng)用兩種或兩種以上方法進(jìn)行保藏。通常采用短期保藏法和長期保藏法共同操作,避免由儲存設(shè)備出現(xiàn)問題對菌株產(chǎn)生影響。
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比較廣泛使用的三種方法,分別是傳代培養(yǎng)法、甘油保藏法和瓷珠保藏法。小編將對這三種方法的優(yōu)缺點(diǎn)分別列舉出來,便于大家找到最適合自己的操作方法。??

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操作步驟

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