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GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗及注意事項

發(fā)布時間: 2022-02-23

《GB 29921-2021預包裝食品中致病菌限量》于2021年11月22日實施,其中,肉制品和即食果蔬制品中致病菌指標變化較大,刪除了大腸埃希氏菌O157:H7/NM,新增加了致瀉大腸埃希氏菌項目,引起了廣大檢驗同行的關注!

GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗及注意事項


對于沒接觸過這個標準的小伙伴們來說,致瀉大腸埃希氏菌聽起來比較陌生,那就跟隨小編來一起了解下這個標準吧!


致瀉大腸埃希氏菌簡介


致瀉大腸埃希氏菌(Diarrheogenic?E. coli,DEC),是一類能引起人體以腹瀉癥狀為主的大腸埃希氏菌,可經過污染食物引起人類發(fā)病。常見的致瀉大腸埃希氏菌主要包括腸道致病性大腸埃希氏菌EPEC、腸道侵襲性大腸埃希氏菌EIEC、產腸毒素大腸埃希氏菌ETEC、產志賀毒素大腸埃希氏菌STEC(包括腸道出血性大腸埃希氏菌EHEC)和腸道集聚性大腸埃希氏菌EAEC。


GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗及注意事項


致瀉大腸埃希氏菌檢驗程序

GB4789.6-2016


選擇性增菌


樣品經營養(yǎng)肉湯增菌后轉接到腸道菌增菌肉湯中。

? 注意

1、營養(yǎng)肉湯增菌時間為6h,時間過長會增加非目標菌的數(shù)量;


2、腸道菌增菌肉湯的培養(yǎng)溫度為42℃,有助于抑制非腸道菌生長。


GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗及注意事項

五種致瀉大腸埃希氏菌及大腸埃希氏菌在腸道菌增菌肉湯中生長情況



選擇性分離



將增菌液劃線接種MAC和EMB瓊脂平板,于36℃ ± 1℃培養(yǎng)18h~24h,觀察菌落特征:

在MAC瓊脂平板上,分解乳糖的典型菌落為磚紅色至桃紅色,不分解乳糖的菌落為無色或淡粉色;

GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗及注意事項


在EMB瓊脂平板上,分解乳糖的典型菌落為中心紫黑色帶或不帶金屬光澤,不分解乳糖的菌落為無色或淡粉色。

GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗及注意事項






生化鑒定




GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗及注意事項

GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗及注意事項

DBI-09?致瀉大腸埃希氏菌干制生化鑒定試劑盒



五種致瀉大腸埃希氏菌與大腸埃希氏菌生化反應一致,無法區(qū)分,需要通過PCR進行進一步確認。


PCR確認實驗


GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗及注意事項

MX-2101?五種致瀉大腸埃希氏菌多重PCR檢測試劑盒

GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗及注意事項

陸橋五種致瀉大腸埃希氏菌多重PCR檢測試劑盒操作流程示意圖




GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗及注意事項

五種致瀉大腸埃希氏菌多重PCR檢測瓊脂糖凝膠電泳


GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗及注意事項

五種致瀉大腸埃希氏菌目標條帶與型別對照表(GB4789.6-2016



根據瓊脂糖凝膠電泳中樣品DNA的擴增條帶大小,與GB 4789.6-2016中表5(如上)進行對照,作為最終的結果進行報告。每次PCR反應使用 EPEC、EIEC、ETEC、EHEC、EAEC標準菌株作為陽性對照。




MX-2101?五種致瀉大腸埃希氏菌多重PCR檢測試劑盒


北京陸橋的五種致瀉大腸埃希氏菌多重PCR檢測試劑盒采用多重PCR技術,適用于五種致瀉大腸埃希氏菌的體外核酸檢測:

01

每個反應體系均含有大腸埃希氏菌種屬鑒定和毒力基因檢測的十二對特異性引物,一次反應即能鑒定五種致瀉大腸埃希氏菌的型別;

02

采用國際先進的預混凍干技術,既簡化了操作(兩步即可上機),又能使產品可以常溫或冷藏運輸,且保持Taq酶較高的酶活性,極大的方便了客戶的檢測工作。



檢驗產品列表


GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗及注意事項

相關產品詳情可點擊以下查詢:


CM142?營養(yǎng)肉湯(不含糖)


CM144?腸道菌增菌肉湯(EE)


CM908B?麥康凱瓊脂?


CM105?伊紅美藍瓊脂(EMB)


DBI-09?致瀉大腸埃希氏菌干制生化鑒定試劑盒?


MX-2101?五種致瀉大腸埃希氏菌多重PCR檢測試劑盒?




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